Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ELISA Kit for Kelch Like ECH Associated Protein 1 (KEAP1)

INrf2; KLHL19; Cytosolic inhibitor of Nrf2; Kelch-like protein 19

  • Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 产品包装(模拟)
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  • Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 实验结果图
  • SEL648Hu.jpg 标准曲线图
  • Certificate 通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

特异性

本试剂盒用于检测Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)，经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差： CV<10%
批间差： CV<12%

稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

实验流程

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。

实验原理

将Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值)，计算样品浓度。

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参考文献

杂志 参考文献
Environmental Toxicology and Pharmacology Ameliorative potential of linagliptin and/or calcipotriol on bleomycin-induced lung fibrosis: In vivo and in vitro study [pubmed:28192751]
Journal of Infection and Chemotherapy Targeting the proinflammatory cytokines, oxidative stress, apoptosis and TGF-β1/STAT-3 signaling by irbesartan to ameliorate doxorubicin-induced hepatotoxicity [Pubmed:29753615]
Immunopharmacology and immunotoxicology Protective effect of sesamin in lipopolysaccharide-induced mouse model of acute kidney injury via attenuation of oxidative stress, inflammation, and apoptosis [Pubmed: 30488751]
International Immunopharmacology S-allyl cysteine protects against lipopolysaccharide-induced acute kidney injury in the C57BL/6 mouse strain: Involvement of oxidative stress and inflammation [Pubmed: 30665040]
Respiratory physiology & neurobiology Targeting oxidative stress, proinflammatory cytokines, apoptosis and toll like receptor 4 by empagliflozin to ameliorate bleomycin-induced lung fibrosis [Pubmed: 31600583]
Vet Sci Protective and Therapeutic Effects of Orlistat on Metabolic Syndrome and Oxidative Stress in High-Fat Diet-Induced Metabolic Dysfunction-Associated Fatty Liver … [34822647]
Antioxidants (Basel) Hepatoprotective Effect of Bee Bread in Metabolic Dysfunction-Associated Fatty Liver Disease (MAFLD) Rats: Impact on Oxidative Stress and Inflammation [34943134]
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