肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ELISA Kit for Chymase 1, Mast Cell (CMA1)

CYH; CYM; Alpha-chymase; Mast cell protease I

  • 肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 产品包装(模拟)
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  • 肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 实验结果图
  • SEG515Mu.jpg 标准曲线图
  • Certificate 通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

特异性

本试剂盒用于检测肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)，经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

回收率

分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)（加标样品），重复测定并计算其均值，回收率为测定值与理论值的比率。

样本 回收率范围(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 96-104 101
EDTA plasma(n=5) 82-95 89
heparin plasma(n=5) 83-94 86

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差： CV<10%
批间差： CV<12%

线性

在定值血清及血浆样本内加入适量的肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)，并倍比稀释成1:2，1:4，1:8，1:16的待测样本，线性范围即为稀释后样本中肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)含量的测定值与理论值的比率。

样本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 99-105% 97-105% 97-105% 81-93%
EDTA plasma(n=5) 84-94% 87-99% 96-104% 99-105%
heparin plasma(n=5) 97-104% 88-96% 80-101% 87-97%

稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

实验流程

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。

实验原理

将肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值)，计算样品浓度。

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参考文献

杂志 参考文献
Pathobiology Anti-Angiotensin and Hypoglycemic Treatments Suppress Liver Metastasis of Colon Cancer Cells [Karger: 000330169]
Clinical and Experimental Metastasis Diabetes-associated angiotensin activation enhances liver metastasis of colon cancer [PubMed: 22552372]
Mediators of Inflammation Mediators of Mast Cells in Bullous Pemphigoid and Dermatitis Herpetiformis [Pubmed:25400334]
Neurogastroenterology &amp; Motility Peritoneal mast cell degranulation and gastrointestinal recovery in patients undergoing colorectal surgery [Pubmed:25677271]
IJC Metab Endocr The autocrine role of tryptase in pressure overload-induced mast cell activation, chymase release and cardiac fibrosis [PubMed: 26722642]
Journal of Neuroinflammation Oral sensitization to whey proteins induces age-and sex-dependent behavioral abnormality and neuroinflammatory responses in a mouse model of food … [Pubmed:29685134]
Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo Vasoactive intestinal peptide degradation might influence Interleukin-17 expression in cardiac chagasic patients [Pubmed: 30365640]
Science Advances Platelets trigger perivascular mast cell degranulation to cause inflammatory responses and tissue injury [Pubmed: 32206714]
Immunity Inflammation and Disease Disruption in the balance between apolipoprotein A‐I and mast cell chymase in chronic hypersensitivity pneumonitis [Pubmed: 33016012]
Microbiol Spectr Mast Cell-Derived Proteases Induce Endothelial Permeability and Vascular Damage in Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome [Pubmed:35612327]
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