坐骨神经损伤(SNI)大鼠模型

Rat Model for Sciatic Nerve Injury (SNI)

Nervi ischiadicus

  • 编号DSI838Ra01
  • 物种Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 相同的名称,不同的物种。
  • 原型物种
  • 来源夹闭坐骨神经干导致坐骨神经损伤
  • 模式动物品系SPF 级SD大鼠,雄性,8 周
  • 实验分组随机分组:对照组,模型组,阳性药物组,受试药物组(三个剂量梯度组),15只每组
  • 实验周期4 weeks
  • 建模方法建模方法:对雄性大鼠行腹腔注射麻醉。将大鼠俯卧位固定于鼠固定架上,铺孔巾,暴露鼠左下肢并剪掉鼠毛。碘酒、酒精消毒三遍,于左侧股后正中行纵行、长约6-8mm切口,暴露皮下肌肉。用止血钳钝性分离股二头肌、半腱肌、半膜肌后,分离出白色、粗大的坐骨神经,刺激后左足出现抽动。距坐骨结节6-8mm处(定位);用大止血钳夹闭坐骨神经干,压满3扣;挤压5秒钟后松开止血钳,间隔10秒后再夹闭5秒钟,再放松10秒,第三次再夹闭5秒(定时)。神经干挤压伤宽度约3mm。9-0无创缝线标记后,将坐骨神经送回原位,整理肌肉,缝合创口;假手术组大鼠麻醉后,仅切开皮肤暴露左侧坐骨神经但不做钳夹,在相应部位相同方法标记后缝合。

    后期取材:将取出的动物饲养一周,结束后,注射水合氯醛麻醉大鼠,将鼠仰卧位固定于大鼠固定架上。自颌下至小腹行胸、复联合切口,切断肋骨,剪断膈肌,暴露出跳动的心脏。用16号针头由左心尖刺入左心室,用软静脉留置导管沿左心室经主动脉瓣插入主动脉,剪开右心耳。先用0.9%生理盐水250ml快速冲洗组织内血液,其后用4%多聚甲醛固定液快速推注100ml,再缓慢推注100ml,直至使鼠尾巴翘起,身体逐渐僵硬,颜色变白为止。灌注后,立即将身体一僵硬的鼠于俯卧位固定于手术台上,由胸-骶部沿脊柱正中切开,暴露及分离背部肌肉,沿十二肋肌部切断T12 L1水平脊柱、脊髓。沿坐骨神经走行切腰4、腰5、骶1段脊髓和包括挤压伤在内的上下各2mm的坐骨神经。同法切取假手术组的相应部位等长标本。分三种方法进行处理及固定。(1) 4%多聚甲醛固定液中固定,制备石蜡切片。(2) 2.5%戊二醛液固定后,备做电镜。(3)液氮中冷冻,备做冰冻切片。
  • 应用疾病模型
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  • 规格 每例
  • 价格 ¥ 720
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  • 坐骨神经损伤(SNI)大鼠模型 产品包装(模拟)
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  • 坐骨神经损伤(SNI)大鼠模型 Figure. HE staining of rat sciatic nerve tissue. A: control group, B: SNI group
  • Certificate 通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

模型评价

组织病理学

1、大鼠坐骨组织病理检查
坐骨神经组织在4%多聚甲醛中固定24 小时后,包埋成石蜡块。石蜡块放在-20℃冰箱中冰一下,在切片机上进行切片,切片厚度4um,置于水槽中展开、捞片和贴片。石蜡切片切好后需要烤片,60℃烤片2 小时。进行Loyez苏木精染色,光镜下观察再生髓鞘的情况。
2、 TUNEL检测坐骨神经组织凋亡情况
坐骨神经组织切片脱蜡,蛋白酶K室温下消化,TDT酶反应液37℃孵育 1 h,0.3%H2O2抑制内源性过氧化物酶,Streptavidin-HRP 室温5min,DAB 显色,苏木精复染。阴性对照采用无酶标记液(去除TDT)代替TDT酶反应液。凋亡细胞核呈棕褐色颗粒,光镜下观察并计数凋亡细胞。
3、电镜观察自噬情况
坐骨神经组织2.5%戊二醛液固定,制备电镜样品,利用电镜在超微结构水平观察坐骨神经组织中自噬情况。

标志因子水平

统计学分析

应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显

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编号 适用物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 应用(仅供研究使用,不用于临床诊断!)
DSI838Ra01 坐骨神经损伤(SNI)大鼠模型 疾病模型
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