急性脊髓损伤(ASCI)大鼠模型
Rat Model for Actue Spinal Cord Injury (ASCI)
Traumatic Spinal Cord Injury
- 编号DSI545Ra01
- 物种Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 相同的名称,不同的物种。
- 原型物种人
- 来源Allen’s法导致脊髓损伤
- 模式动物品系SPF级Wistar大鼠,健康,雄性,体重为180g~200g
- 实验分组实验分六组:正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组,每组15只动物。
- 实验周期4w
- 建模方法1.取正常大鼠用水合氯醛作腹腔麻醉(350mg/kg),将大鼠俯卧,固定于大鼠固定板上,在背部脊髓两侧触摸大鼠最下肋与软组织分界处(浮肋与第 13胸椎连接处)作为骨定位标志,向上、下5 cm 范围备皮、脱毛后常规消毒,铺无菌手术单,在后正中线做纵行切口,大约 3cm,依次切开皮肤、皮下筋膜,暴露椎旁肌,约平对第 10 胸椎棘突,钝性剥离肌肉暴露棘突、椎板和横突。参考定位:T9棘突倾向尾侧,T10 棘突中立位,T11 棘突倾向头侧。
2.确定 T10胸椎位置,用骨剪在 T9 与 T10、T10与T11 棘突及相应椎板之间分别做两个横行剪口,再在 T10 胸椎两侧,横突与椎板连接处做纵行剪口,形成一个方形剪口界线,然后用咬骨钳咬住 T10 胸椎棘突用力拉起即“揭盖”,去除 T10 椎板,形成方形骨窗,修整骨窗边缘,充分暴露 T10对应的脊髓。
3. 用Allen' s 撞击器制备脊髓损伤动物模型,打击时,用拉钩拉开脊髓两侧软组织,牵拉固定,使脊柱稳定,不受呼吸运动影响,使 20 g 重量的击打棍从 3 cm 高度自由落体,致伤能量 60 g·cm,撞击T10 骨窗对应的脊髓,造成急性脊髓损伤,击打脊髓后,击打棍不动,停留 3 min 再移开。
4. 撞击成功标准为:撞击脊髓组织水肿、出血,硬脊膜完整呈紫红色,紧张,膨隆,大鼠尾巴出现痉挛性摆动,双下肢躯体回缩样扑动,呈迟缓性瘫痪。常规分层缝合后回笼饲养。
5. 术后4W,水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠后,将大鼠固定于固定板上,暴露脊髓 T8~ T12,迅速取出脊髓组织,4%多聚甲醛后固定 4 h,石蜡包埋切片(厚4um),HE染色,观察病理改变。 - 应用疾病模型
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- 规格 每例
- 价格 ¥ 1440
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模型评价
1. 术后一般情况观察 :各损伤组大鼠的术后基本情况基本一致,打击后大鼠均表现为身体痉挛性颤动,尾巴痉挛性摆动,双下肢及躯体回缩样扑动。麻醉苏醒后大鼠双下肢呈弛缓性瘫痪,可出现尿潴留或尿失禁。解剖可见伤后大鼠硬脊膜内充血或水肿。
2.做BBB评分:0分:无可见后肢运动,1分:一或两个关节轻微运动,通常为髋和/或膝关节,都可认为造模成功;
3.斜板实验:将大鼠身体垂直于斜板的纵轴放置,斜板由自制的表面粗糙的木板制成,大鼠利用前肢和后肢的力量保持身体停留自斜板上。斜板每次升高或降低5度,以保证大鼠能停留在斜板上5秒,以能停留5秒的最大角度为其功能值。
4.BDA示踪术:术后5W,将大鼠麻醉后固定在脑立体定位仪上,纵行切开颅顶区头皮,剪开骨膜并推向四周,双氧水棉签擦拭颅骨,参考大鼠脑离体定位图谱,以前囟为原点,共选择 8 个位置钻孔,微量进样器将5% BDA 溶液1μL注射入大鼠脑运动皮质区,进针深度自颅骨表面起始约3.5mm,微量注射泵设置注射时间为5min,(留针5min)注射完毕后缝合头皮。2w后取损伤节段以下脊髓组织标本进行BDA 荧光染色,观察皮质脊髓束神经纤维。
5.大鼠坐骨神经荧光金逆行追踪:各组随机取大鼠,麻醉后沿股外侧肌间隙显露坐骨神经,通过组织钳钳夹挫伤坐骨神经,在避光条件下使用微量注射器在坐骨神经挫伤区多点注射2%荧光金,每侧坐骨神经注射0.4ul,注射速度为0.1ul/min。每注射位点留针5min,切口内撒8*104U的青霉素粉剂,逐层缝合切口,造模后正常饲养。1周后予脊髓损伤处取材进行组织学检查。进行冰冻切片,20um切片,每组每只动物5张切片,荧光显微镜下观察荧光金标记细胞的分布情况。
组织病理学
HE 染色可以观察到假手术组灰、白质组织结构基本完整,神经细胞在灰质中分布均匀、胞体饱满、形态正常、细胞膜完整,白质内神经纤维排列整齐, 细胞间质均匀。SCI 组可见灰、白质组织结构不完整,损伤区灰质可见大片出血、大片坏死灶 、细胞肿胀、有的出现囊腔,白质内神经纤维排列不规则。
标志因子水平
统计学分析
应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显
增值服务
组织/切片定制服务
血清定制服务
免疫组织化学(IHC)实验服务
小动物微型CT成像实验服务
小动物核磁共振(MRI)成像实验服务
小动物超声成像实验服务
透射电镜(TEM)实验服务
扫描电镜(SEM)实验服务
学习与记忆行为学实验服务
焦虑与抑郁行为学实验服务
药物成瘾行为学实验服务
疼痛行为学实验服务
神经精神异常行为学实验服务
疲劳行为学实验服务
一氧化氮测定试剂盒 (A012)
一氧化氮测定试剂盒 (A013-2)
总抗氧化能力检测试剂盒A015-2)
总抗氧化能力检测试剂盒(A015-1)
超氧化物歧化酶试剂盒
果糖检测试剂盒
柠檬酸检测试剂盒
过氧化氢酶检测试剂盒
丙二醛检测试剂盒
谷胱甘肽S-转移酶试剂盒
还原型谷胱甘肽测定试剂盒
谷胱甘肽还原酶活性系数测定试剂盒
血管紧张素转换酶测定试剂盒
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)试剂盒
流式荧光发光法检测试剂盒定制服务
云克隆多因子检测试剂盒
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