苏木素-伊红染色液

使用说明书

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

第1版（2016年04月修订）

[关联信息]

HE染色法采用两种染料即碱性染料苏木素和酸性染料伊红分别于细胞核和细胞质发生作用，使细胞的微细结构通过颜色而改变它的折光率，从而在光镜下能清晰地呈现出细胞图像。组织细胞内含有酸性物质和碱性物质，其中酸性细胞核会被碱性的苏木素染成蓝色，而碱性的胞浆被会被酸性染料伊红染成红色，从而使得胞核呈蓝色，胞浆呈红色。

[制品内容]

编号	名称	规格
IS098-1	苏木素染液工作液	100ml
IS098-2	伊红染液工作液	100ml

[储存及有效期]

低温阴凉处保存，有效期一年。

[使用方法]

以下步骤仅供参考

（一）石蜡切片染色

1. 取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。

2. 石蜡切片脱蜡水化：

①二甲苯（I）中脱蜡10min。

②换用新鲜的二甲苯（Ⅱ），再脱蜡10min。

③无水乙醇 5 min。

④95%乙醇 2min。

⑤80％乙醇 2min

⑥70%乙醇 2min。

⑦蒸馏水   2min。

3. 苏木素染液染色5-10min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，蒸馏水冲洗。

4. 分化液分化3s, 自来水冲洗干净。

5. 自来流水冲洗5-10min      。

6. 置伊红染液1min-2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)。

7. 蒸馏水浸泡 15s。

8. 脱水，透明，封片：

①95％乙醇（I）30s

②95％乙醇（Ⅱ）30s

③100％乙醇（I）1min

④100％乙醇（Ⅱ）1min

⑥二甲苯（I）10min

⑦二甲苯（Ⅱ）10min

⑧中性树胶封固，镜下观察。

（二）冰冻切片染色（快速染色法）

1. 将冰冻切片置于固定液中固定30s－1min。

2. 蒸馏水冲洗。

3. 置于苏木素染液工作液染色3－5min。

4. 分化液分化3s。

5. 蒸馏水浸泡 15min 或温水（约 50℃）5min。

6. 置伊红染液10-20s (具体时间根据染色结果和实验要求调整)，蒸馏水冲洗。

7. 脱水，透明，封片。（步骤同石蜡切片）

[注意事项]

1、石蜡切片脱蜡应尽量干净，操作过程中使用的乙醇需经常更换新液。

2、安排好预实验，确定好染色的时间，通常只需能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞质颜色。

3、冰冻切片染色时间尽量缩短，避免染色过量使得结果不好分析。

4、低温情况下分化液可能会产生些许沉淀。如果发现有沉淀产生，请置于37℃水浴至完全溶解后使用。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作并严格按照实验室安全操作手册进行。

6、伊红在纯水和梯度酒精脱水的时候容易褪色，后期脱水不宜在梯度酒精浸泡太久。