人源细胞STR鉴定服务

使用说明书

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

第1版（2016年04月修订）

背景介绍　　

STR（Short Tandem Repeat，短串联重复序列），是一类广泛存在于真核生物基因组中的DNA串联重复序列，基因位点由长度为3-7个碱基对的短串连重复序列组成，这些重复序列广泛存在于人类基因组中，可作为高度多态性标记，由于其核心序列重复次数存在个体差异多态性，被称为细胞的DNA指纹，其可通过聚合酶链式反应来检测。目前STR检测已被广泛应用于亲子鉴定、个体识别、细胞来源判定等方面。ATCC、DSMZ、JCRB等国际知名细胞库已将STR基因分型列为细胞鉴定的金标准。 　　

STR基因座位上的等位基因可通过扩增区域内重复序列的拷贝数的不同来区分，在毛细管电泳分离之后可通过荧光检测来识别。随后通过一定的计算方法，即可根据所得的STR分型结果与专业的细胞STR数据库比对从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。

服务项目 　　

提供人源细胞21个基因座检测，所选用的基因座不仅包含ATCC、DSMZ和JCRB细胞库中的基因座，更添加12个高度多态性位点，具有极高的准确性。 　　

细胞鉴定标准符合美国2011年《ANSI/ATCC ASN-0002-2011》以及2020年版《中华人民共和国药典：四部》要求。

检测方法

用Ezup 柱式基因组抽提试剂盒提取 DNA，采用 21 ID system扩增20个STR位点和性别鉴定位点，使用Seqstudio遗传分析仪(Applied Biosystems)对PCR产物进行检测，使用GeneMapper6.0 软件(Applied Biosystems)对检测结果进行分析，并与ExPASy数据库进行比对。

人类鉴定基因座　

AMEL，D3S1358，D13S317，D7S820，D16S539，CSF1PO，Penta D，D21S11，D5S818，D18S51，D19S433，D6S1043，TH01，FGA，D2S1338，D12S391，vWA，D8S1179，TPOX，Penta E，D2S441

服务流程 

收集细胞、样本寄送、DNA提取、多重荧光PCR、毛细管电泳检测、GeneMapper数据分析、数据库比对 

样本要求 

（1）活细胞： 细胞数≥10^6 cells T25瓶灌满，常温运输 

（2）细胞沉淀： 细胞数≥10^6 cells 离心后去上清，2~8℃运输

（3）冻存细胞： 细胞数≥10^6 cells， 干冰运输 

（4）DNA样本： OD260/OD280 = 1.8-2.0，DNA浓度≥50ng/uL，DNA体积≥20uL，干冰运输 

结果提供 

STR 分型图谱和检测结果的书面报告。

案例展示

SY5Y 细胞STR鉴定结果的图谱。

SY5Y：该株细胞DNA分型在细胞系检索中找到匹配的细胞系，检测到与数据库中的SY5Y细胞匹配度达100%。本次检测在该细胞系中未发现多等位基因。